DNA遗传标记ppt课件

发布时间:2013-07-19

课件大小:0.47 MB

所属栏目:医药类

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课件等级:DNA遗传标记ppt课件推荐等级为3星

简略标题:DNA遗传标记

应用环境:应用于多媒体教学

制作使用软件:PowerPoint

应用阶段:特种医学

DNA遗传标记ppt课件介绍及下载


DNA遗传标记ppt课件内容预览:3.多态性程度高,等位基因多,鉴别能力强。4.适合于陈旧的样品,检测能力强。5.灵敏度高,有利于微量样品的检测。6.易于检测手段的自动化、标准化,重复性好。逐渐取代了蛋白质水平的检测方法。第一部DNA基础一、DNA结构与特征1.DNA分子结构线性大分子-基本单位为脱氧核苷酸组成----碱基、脱氧核糖、磷酸差别----碱基:嘌呤碱—腺嘌呤(A)与鸟嘌呤(G)嘧啶碱—胞嘧啶(C)与胸腺嘧啶(T)结构:碱基+脱氧核糖=脱氧核苷-+磷酸=脱氧核苷酸ppt3.基因突变突变(mutation):DNA分子中的核苷酸序列的改变。1)点突变(point mutation):单碱基置换。同义突变(same sense mutation):简并密码,无突变效应。错义突变(missense mutation):新密码子,氨基酸序列变化,产生突变效应。无义突变(non-sense mutation):变成终止密码,合成不完整多肽产生突变效应。终止密码突变(terminator codon mutation):合成过长的多肽,产生突变效应。移码突变(frame-shift mutation):DNA链中插入1个或几个单碱对,使突变处以下部位密码发生变化,使合成的氨基酸种类或序列变化,产生突变效应。2)片段突变:DNA链中小片段单碱序列发生缺失、重复或重排,产生突变效应。单碱基突变(图中用黑点示意位置为突变点)三、DNA多态性的分类1)长度多态性:等位基因片段长度的个体差别。由一特定序列,首尾相连串联重复次数不同产生的个体差别。可变数目串联重复(variable number oftandem repeat,VNTR)短串联重复(short tandem repeat,STR)A:产生原因:DNA滑动与同源染色体不等交换。1)序列多态性:DNA片段碱基排列顺序的个体差别。单核苷酸多态性(single ucleotidepolymorphism,SNPs)原因:碱基的置换、插入、缺失。特点:多位于非编码区,选择压力。数量多,11000bp,300万二态性,2个等位基因,多态性程度较低。孤立事件,人类遗传学意义大。第二部分DNA的制备五、其他方法1.Chelex-100提取DNA基本成分:含有亚氨基二乙酸盐离子的苯乙烯-二乙基苯共聚物。基本方法:沉淀细胞;5试剂200μl;56℃0.5h以上;100℃8min;剧烈震荡;离心上清。注意:离心彻底。2.硅珠法提取DNA基本成分:GuSCN(硫氰酸胍,蛋白变性剂)与二氧化硅(硅珠,核酸吸附剂)。基本方法:血液(1-4μl)TES(100μl)SDS(20μl)煮沸5min;300μlGuSCN溶液与20μl硅珠液保温15min;离心;离心加GuSCN溶液;离心加乙醇漂洗;TES56℃10min离心取上清。3.直接煮沸法,100℃10min七.不同生物性检材的DNA制备1.混合斑二步提取法(精液与阴道液)原理:精子细胞膜富含硫醇蛋白,包裹DNA的鱼精蛋白富含半光氨酸,二硫键丰富,可抵抗蛋白酶作用。二硫苏糖醇(DTT)可还原二硫键,使蛋白酶发生作用。方法:(1)分离细胞成分。(2)常规消化。(3)加10DS40μl,1molL DTT16μl ,10μgμl蛋白酶K4μl,37℃过夜。(4)常规处理。八.DNA定量1.凝胶电泳半定量分析法标准参照分析。2.分光光度计分析原理:核酸于260nm波长为吸收峰,1OD值为50μgμl双链核酸(40μgμl单链核酸),根据OD值可计算DNA含量。蛋白于280nm波长为吸收峰,260280比检测
课件关键字:DNA遗传标记,遗传。
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